LIM-51
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Apresentação e Histórico
Em 1992, Prof. Dr. Irineu Tadeu Velasco foi escolhido como Professor titular da recém-criada Disciplina de Emergências Clínicas da Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo. Pela primeira vez, no Brasil, o atendimento das emergências clínicas era visto como uma área com particularidades próprias dentro da Clínica Médica.
Uma vez empossado, Prof. Irineu Velasco notou a deficiência no País de Ensino e Pesquisa específicos na área e suas primeiras medidas no sentido de corrigir essas falhas foram:
- Criar um Programa de Pós-Graduação que abrangesse temas e orientadores afins com o assunto e
- montar um laboratório onde se desenvolvesse pesquisa translacional de qualidade, dirigida a problemas encontrados em salas de emergência.
Assim, em 1996 foi criado o Laboratório de Investigação Médica (LIM-51). Prof. Irineu recebeu da direção da FMUSP, uma área no terceiro andar, que foi reformada com verbas da Fundação Zerbini.
A seguir, reuniu um grupo de pesquisadores atuantes na própria Disciplina e criou um Projeto Temático que foi aprovado pela FAPESP sob número 96/10377-7.
Os recursos oriundos desse projeto permitiram que o LIM-51 fosse completamente equipado e funcionante em 1997, tendo sido oficialmente inaugurado pelo então Diretor, Prof. Dr. Marcelo Marcondes, em 26 de setembro de 1997.Desde então, o LIM-51 agregou diversos docentes da Disciplina e foi responsável pela formação de toda uma geração de pesquisadores na área.
Hoje, ainda sob a liderança do Prof. Irineu Velasco, o LIM-51 exibe uma produção científica consistente e de qualidade, sempre procurando a excelência, com ênfase na pesquisa translacional, isto é, ligando os conhecimentos básicos à prática clínica.
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Estrutura Física
O Laboratório de Investigação Médica (LIM-51) da Disciplina de Emergências Clínicas da Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo está localizado no 3o andar do prédio da Faculdade de Medicina, ocupando uma área física de aproximadamente 150 m2. Além dessa área exclusiva de nosso laboratório, fazemos parte, junto com a Disciplina de Pneumologia, de um laboratório onde está instalada toda a estrutura de uma unidade de terapia intensiva e são realizados experimentos de ventilação assistida e cuidados intensivos para animais de médio porte. Esse laboratório encontra-se no 2o andar do mesmo prédio e tem uma área de 40 m2.
A seguir, serão detalhados os equipamentos em utilização no LIM-51 e seus usos específicos.
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Sala de Cultura de células
O LIM-51 possui uma sala específica para cultura de células:
- fluxo laminar
- estufa
- geladeira e freezer para armazenamento dos meios de cultura
- banho para aquecimento dos materiais.
Além disso, possui local para armazenagem e todo o equipamento necessário para lavagem e preparo do material usado nos experimentos.
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Sala de cirurgia totalmente equipada
O LIM-51 possui sala e material necessário para cirurgia de pequenos e médios animais:
- mesas cirúrgicas
- focos luminosos
- todo o material para cirurgia e microdissecção
- duas lupas para microcirurgia, com braço retrátil e foco próprio
- monitores e transdutores que permitem a monitorização de pressão, fluxo, etc., durante todo o experimento
- ventiladores para pequenos animais, permitindo cirurgias mais longas
Existe também estrutura para esterilização de material, o que possibilita que sejam realizadas cirurgias em ambiente estéril.
Essa estrutura é usada em experimentos os mais variados:- modelos animais de choque e reperfusão, local e global
- modelos animais de sepse
- preparo de culturas primárias de células de diversos tecidos (células da parede arterial, cardiomiócitos, etc.)
- retirada de órgãos e tecidos de animais de diversos protocolos experimentais
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Preparo de lâminas para histologia
Todas as lâminas histológicas dos os experimentos realizados no LIM-51 são processadas e preparadas em nosso próprio laboratório. Para isso contamos com:
- histotécnico completo
- criostato
- micrótomo
- central de inclusão em parafina
- microscópio
Nossa central prepara, para futura análise pelos pesquisadores, aproximadamente 1500 lâminas por mês. Além do preparo de colorações simples, como HE, temos tecnologia e material para realização de colorações especiais (histoquímica, por exemplo, para marcação de colágeno) ou imunohistoquímica.
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Analisador de imagens
As lâminas histológicas de tecidos ou células são analisadas em nosso próprio laboratório, através de um sistema, localizadas em câmara escura específica, composto por:
- um microscópio Leica, com leitura de fluorescência
- computador
- software específico para análise de imagens
Esse equipamento é usado para análise de lâminas nos mais variados experimentos, como por exemplo:
- mensuração de área de necrose em modelo experimental de infarto cerebral ou do miocárdio
- mensuração do tamanho de placa aterosclerótica em modelo experimental de aterosclerose
- identificação de tipos celulares específicos em processos inflamatórios
- imunohistoquímica ou imunofluorescência
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Patch-clamp
Temos em nosso laboratório toda a aparelhagem necessária para realização de experimentos de patch clamp:
- gaiola de Faraday
- micromanipuladores
- amplificadores
- estirador automático de pipetas
- softwares específicos para análise dos dados
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Biologia molecular e proteômica
Em nosso laboratório utilizamos a biologia molecular como instrumento para entender fenômenos complexos em animais ou células em cultura. Assim, temos toda a estrutura para realizar experimentos de:
- genotipagem
- determinação de RNAm, por RT-PCR
- determinação da expressão de proteínas por imunoblot
- ensaios de zimografia, nitrosilação proteica
- eletromobilidade em gel
Para isso, contamos com os aparelhos:
- Termociclador para análise de reações de PCR quantitativas em tempo real (Real Time – PCR)
- termociclador
- centrífuga refrigerada
- centrífuga
- vortex
- analisador de imagem que permite a revelação de géis de agarose ou SDS-PAGE, provendo análise quantitativa das bandas de RNA ou proteína detectadas
- cubas para separação em gel (5)
- toda a vidraria e material necessário
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Estudo de comportamento
Em experimentos específicos, estudamos modelos experimentais de prevenção de lesão cerebral. Para estudo posterior do comportamento, utilizamos:
- caixa de esquiva
- telemetria
- I. 4 gaiolas de comportamento (com roda, etc)
- II. antena/transmissor
- III. receptor/transdutor/decodificador
- IV. computador e software específico para análise dos dados
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Experimentos específicos:
Para alguns experimentos específicos, são utilizados equipamentos somente para esse fim:
- I. para realização de ensaios de detecção de espécies reativas de oxigênio:
- luminômetro (Berthold)
- II. leitura de placas de ELISA:
- leitor de placa com capacidade para leitura de absorbância, luminescência e fluorescência (Molecular Devices) além de aparelho capaz de realizar múltiplas dosagens por ELISA simultaneamente (tecnologia Multiplex), MagPix (Luminex Corp)
- III. preparações de músculo papilar isoladas
- leitor de tensão comcomputador acoplado e software específico
- IV. experimentos de reatividade vascular
- banho de órgãos
- transdutores de tensão
- computador e software específico
- V. preparação de langendorf
- bombas
- transdutores
- I. para realização de ensaios de detecção de espécies reativas de oxigênio:
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Unidade de terapia intensiva para animais
Essa unidade se encontra em sala separada do LIM-51 e é utilizada em conjunto com a Disciplina de Pneumologia. Lá são realizados experimentos onde animais de médio porte (coelhos, porcos) são mantidos sob ventilação mecânica e monitorizados para experimentos de longa duração.
Essa unidade conta com:
- monitores (Dixtal)
- ventiladores
- aparelho para medição de gases e íons
Além disso, existe toda a estrutura de gases, computadores (4) e softwares para análise dos dados.
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Equipamentos comuns
A área de equipamentos de uso comum incluem todos os equipamentos que são usados para tarefas diárias e simples do laboratório:
- centrífuga
- medidor de pH
- balanças
- agitadores
- vortex
- garrafas de nitrogênio líquido
- banhos
- geladeiras (3) e freezers (3) e ultrafreezers (-80oC) (3)
- vidraria completa
Esses equipamentos estão localizados em área específica, onde são preparadas soluções, materiais.
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Computadores para estudo
Os pesquisadores, pós-graduandos e alunos do LIM-51 têm à sua disposição 16 computadores, ligados em rede e à internet, onde podem realizar seus estudos. Seis desses computadores ficam numa sala específica, só para os alunos. Todos os computadores possuem softwares para realização de trabalhos básicos (planilhas, processadores de texto, apresentações) ou mais avançados (estatística, análise de imagens)
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Pesquisadores e Linhas de Pesquisa:
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Prof. Dr. Irineu Tadeu Velasco (Currículo Lattes)
- email: [email protected]
- Lesão de Isquemia-reperfusão
- Solução hipertônica no tratamento do choque hemorrágico e séptico
- Desenvolvimento de drogas fitoterápicas para o tratamento de doenças cardiovasculares
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Prof. Dr. Heraldo Possolo de Souza (Currículo Lattes)
- email: [email protected]
- interações entre metabolismo e inflamação: receptores nucleares e coativadores de transcrição gênica
- mediadores inflamatórios da sepse
- sinalização redox e inflamação
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Prof. Dr. Francisco Garcia Soriano (Currículo Lattes):
- Email: [email protected]
- fisiopatologia da sepse
- modelos experimentais da sepse
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Dr. Fabiano Pinheiro da Silva (Currículo Lattes)
- Email: [email protected]
- SEPSE
- antimicrobianos
- Receptores Fc de imunoglobulinas
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Dra. Thais Martins Lima (Currículo Lattes)
- Email: [email protected]
- Metabolismo lipídico.
- Inflamação e ácidos graxos
- Papel dos lipídeos na Sepse
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Técnicos e Apoio
- Dra Denise Frediani Barbeiro (Currículo Lattes)
Email: [email protected] - Dr. Hermes Barbeiro (Currículo Lattes)
Email: [email protected] - Sueli Kubo (Currículo Lattes)
Email: [email protected] - Fátima Abatepaulo
Email: fá[email protected] - Kelli Gouvea
Email: [email protected] - Geraldo Gomes Sobrinho
Email: [email protected]
- Dra Denise Frediani Barbeiro (Currículo Lattes)
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Projetos em andamento com financiamento:
Título: Biomarcadores em Pacientes Septicos: Uma Abordagem Temporal
Responsável: Irineu Tadeu Velasco
Agência: CNPq
Vigência: 04/2011 a 04/2013Título: Marcadores de Infecção em pacientes críticos
Responsável: Fabiano Pinheiro da Silva
Agência: FAPESP
Vigência: 01/10/2010 a 30/09//2014Título: Sepse – estudo da resposta inflamatória: sinalização, participação das células do sistema imunológico, tolerância e intervenções terapêuticas.
Tipo: Temático
Responsável: Francisco Garcia Soriano
Agência: FAPESP
Vigência: 01/05/10 a 30/04/15Título: Sepse – estudo da resposta inflamatória: sinalização, participação das células do sistema imunológico, tolerância e intervenções terapêuticas.
Tipo: Temático
Responsável: Francisco Garcia Soriano
Agência: CNPq
Vigência:Título: Os Coativadores da Trânscrição Gênica PGC-1 no Processo inflamatório
Tipo: Regular
Responsável: Heraldo Possolo de Souza
Agência: FAPESP
Vigência: 01/08/2012 a 31/07/2014Título: A Imunidade Inata no Idoso: Fatores Predisponentes para a Sepse E Outras Doenças Complexas
Tipo: AUXILIO REGULAR
Responsável: Marcel Cerqueira César Machado
Agência: FAPESP
Vigência: 01/09/2012 a 31/07/2014Título: Role of Fc receptors in bacterial immune evasion
Tipo: PROJETO TEMÁTICO
Responsável: Irineu Tadeu Velasco
Agência: FAPESP
Vigência: 01/02/2013 a 31/01/2016Título: Efeito protetor dos ácidos graxos Omega-3 na aterosclerose: papel dos receptores toll like
Responsável: Thais Martins de Lima Salgado
Agência: CNPq
Vigência: 2011/2012 -
Produção Científica
Artigos Publicados (últimos 5 anos):
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Corpo Discente:
INICIAÇÃO CIENTÍFICA
ALUNO ORIENTADOR PERÍODO Iryna Hirata Prist Thais M. De Lima Salgado Naara Mendes Oliveira Francisco G. Soriano Caroline de Freitas Cirenza Heraldo Possolo de Souza -
Atual
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Dissertações e Teses Defendidas (últimos 5 anos)
Teses de doutoramento completadas e defendidas 54 Dissertações de mestrado completadas e defendidas 7 Estágios de iniciação científica completados (com bolsa) 16 Pós-doutoramentos completados (com bolsa) 4
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